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本文標(biāo)題："相鄰的枯草桿菌細(xì)胞可以互相交換細(xì)胞質(zhì)中的物質(zhì)"

結(jié)果與討論

 相鄰的枯草桿菌細(xì)胞可以互相交換細(xì)胞質(zhì)中的物質(zhì)
顯微鏡首先使用染色體中帶有綠色螢光基因 (gfp)的枯草桿菌細(xì)胞 SB444，與缺
乏 gfp 的 PY79 共同培養(yǎng)在固體培養(yǎng)基上，之后使用螢光顯微鏡觀察。結(jié)果發(fā)
現(xiàn)從 gfp+細(xì)胞所在的位置到 gfp-細(xì)胞，綠色螢光呈現(xiàn)梯度下降，涵蓋的范圍約

有 40 M (圖 1Ab,1B)；當(dāng)將綠色螢光與 phase contrast 影像重迭后，發(fā)現(xiàn)綠色
螢光梯度只存在于有細(xì)胞的位置 (圖 1Ac)。接著顯微鏡使用 time-lapse
microscopy 觀察單一細(xì)胞層次，在 T0 分鐘時(shí)只有 gfp+細(xì)胞所在位置有偵測到
綠色螢光 (圖 1Ca)；30 分鐘過后，gfp+細(xì)胞附近的 gfp-細(xì)胞也開始出現(xiàn)微弱的
螢光訊號 (圖 1Cb)；并且，螢光強(qiáng)度與距離 gfp+細(xì)胞的遠(yuǎn)近呈現(xiàn)函數(shù)關(guān)係 (圖

1D)。接著，顯微鏡使用 Calcein 進(jìn)行測試。Calcein 為十分親油性物質(zhì)，能夠輕
易穿越細(xì)胞膜 但一旦進(jìn)入細(xì)胞后就會(huì)被細(xì)胞質(zhì)中的 esterases 水解成親水性物
；
質(zhì)，而被侷限在細(xì)胞質(zhì)中。顯微鏡首先將 PY79 與 calcein-AM 一同培養(yǎng)，之后再
與未標(biāo)定的細(xì)胞溷合。于 t0 分鐘時(shí)只有被標(biāo)定的細(xì)胞可偵測到螢光強(qiáng)度 (圖
2A,2A’)；但隨著時(shí)間增長，原先未被標(biāo)定的細(xì)胞也開始出現(xiàn)螢光訊號 (圖
2B,2C)；而在 t30 分鐘時(shí)幾乎所有未被標(biāo)定的細(xì)胞都可偵測到螢光訊號，但一
開始被標(biāo)定的細(xì)胞其螢光訊號有減弱的現(xiàn)象 (圖 2C,2C’)。