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本文標(biāo)題:"大腸桿菌及金黃色葡萄球菌細(xì)胞觀察用顯微鏡!"

新聞來(lái)源:未知 發(fā)布時(shí)間:2012-3-12 0:22:00 本站主頁(yè)地址:http://m.bailemeng6.cn

高解析度掃描式電子顯微鏡 (HR-SEM Analysis)
將生長(zhǎng)至對(duì)數(shù)期的枯草桿菌、大腸桿菌及金黃色葡萄球菌細(xì)胞分別或溷合培養(yǎng)

在 LB 或 S7 agar,37℃、3 hr 后將 EM grids 覆蓋上細(xì)胞,再培養(yǎng) 3 hr。將 EM
grids 輕輕移開(kāi)并用 0.1M sodium cacodylate buffer (Na(CH3)2AsO2 3H20; pH 7.2)

洗 之后再用 2﹪glutaraldehyde (溶于 sodium cacodylate buffer)固定細(xì)胞 25℃、


2 hr。接著將細(xì)胞培養(yǎng)在 1﹪osmium tetroxide 中,25℃、1 hr 再次固定細(xì)胞 (需
避光)。接著用逐漸增加濃度的乙醇使標(biāo)本脫水。最后,將黏附于 EM grids 上
的細(xì)胞用逐漸增加濃度的 freon113 洗 之后將標(biāo)本 coating 上 gold-palladium (約8 mm size)后即可使用 FEG HR-SEM 觀察。

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